Tehnica de testare a imunoabsorbției cu enzime legate – în engleză Enzyme-Linked Immuno Assay – sau testul ELISA este un test imunologic care permite detectarea sau analiza moleculelor dintr-o probă biologică. A fost conceptualizat și dezvoltat de doi oameni de știință suedezi, Peter Perlmann și Eva Engvall de la Universitatea din Stockholm în 1971.

Moleculele testate prin metoda ELISA sunt în general proteine. Și tipurile de mostre includ materiale biologice fluide - plasmă, ser, urină, transpirant -, medii de cultură celulară sau o proteină recombinată - proteină produsă de o celulă al cărei material genetic a fost modificat prin recombinare genetică - purificată în soluție.

Testul ELISA este utilizat în principal în imunologie pentru a detecta și/sau măsura prezența proteinelor, anticorpilor sau antigenilor într-o probă. Acest test serologic detectează în special anticorpii produși de organism ca răspuns la contaminarea virală.

Utilizarea anticorpilor pentru diagnosticul bolilor infecțioase reprezintă o metodă specifică și rapidă. Tehnica ELISA este o tehnică imuno-enzimatică care face posibilă vizualizarea, dintr-o probă biologică, a reacțiilor dintre un antigen – un corp considerat străin de organismul viu – și un anticorp folosind o reacție de culoare produsă de un marker enzimatic – în general fosfatază alcalină și peroxidază – atașate anterior de anticorp. Reacția de culoare confirmă identificarea bacteriei izolate sau prezența virusului dorit, iar intensitatea culorii oferă o indicație a cantității de antigene sau anticorpi din proba dată.

Există patru tipuri principale de teste ELISA:

• ELISA direct, face posibilă detectarea sau măsurarea anticorpilor. Utilizează doar un anticorp primar;
• ELISA indirect, cel mai utilizat, face posibilă și detectarea sau testarea anticorpilor. Utilizează un anticorp secundar care îi conferă o sensibilitate mai bună decât ELISA directă;
• ELISA în competiție, permite dozarea antigenelor. Produs prin competiția pentru legături, nu folosește o enzimă;
• ELISA „în sandwich”, permite dozarea antigenelor. Această tehnică este frecvent utilizată în cercetare.

Testul ELISA este utilizat pentru:

• Găsiți și măsurați anticorpii în serologie pentru diagnosticul bolilor infecțioase: virologie, parazitologie, bacteriologie etc.;
• Dozați proteine ​​la concentrații mici: doze specifice anumitor proteine ​​plasmatice (imunoglobulina E (IgE), feritina, hormoni proteici etc.), markeri tumorali etc.;
• Dozați molecule mici: hormoni steroizi, hormoni tiroidieni, medicamente...

Testul ELISA este utilizat în special pentru a diagnostica multe boli infecțioase:

Boli cu transmitere sexuală (BTS)

Inclusiv hepatita, sifilisul, chlamydia și HIV. Recomandat de autoritățile sanitare, este principalul test de screening SIDA: arată prezența anticorpilor anti-HIV și a antigenului p24 la șase săptămâni după infectare.

Boli regionale sau endemice

Febra galbenă, boala cu virus Marburg (MVM), Ladengue, boala Lyme, Chikungunya, febra Rift Valley, Ebola, febra Lassa etc.

Covid-19

A se efectua la mai mult de 2 până la 3 săptămâni de la apariția simptomelor, testul ELISA face posibilă identificarea, în mai puțin de o oră, a prezenței anticorpilor anti-SARS-CoV-2.

Agenti patogeni virali care cauzeaza infectii prenatale

Toxoplasmoza, rubeola, citomegalovirusul, herpesul simplex de exemplu.

Alte cazuri

Dar a găsit și aplicații în detecție:

• Sarcini;
• Boli autoimune;
• Alergeni alimentari: determinarea cantitativă a imunoglobulinelor totale E (IgE) ajută la evaluarea și tratamentul alergiilor;
• Tulburări hormonale;
• markeri tumorali;
• Viruși vegetali;
• Si multe altele

Ca parte a detectării anticorpilor anti-SARS-CoV-2, un studiu pilot realizat în august 2020 de Institut Pasteur, CNRS, Inserm și Universitatea din Paris confirmă fiabilitatea testului ELISA: ambele teste ELISA au testat utilizarea întreaga proteină N a SARS-CoV-2 (ELISA N) sau domeniul extracelular al virusului spike (S) ca antigene țintă. Această tehnică ar face posibilă identificarea anticorpilor în peste 90% din cazuri, cu o rată de fals pozitive foarte scăzută de 1%.

Efectuate în laboratoare de analize pe bază de rețetă medicală, analizele Elisa costă în jur de 10 euro și sunt decontate 100% de Asigurările de Sănătate.

Desfășurate în centrele gratuite de informare, screening și diagnostic (CeGIDD), acestea pot fi gratuite pentru HIV și SARS-CoV-2.